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Thermo NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑

Thermo Scientific NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒可在不到兩小時(shí)內(nèi)高效裂解細(xì)胞并提取單獨(dú)的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白組分。

NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒的特點(diǎn)：

•快速 — 可在不到兩小時(shí)內(nèi)獲得細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)組分
•經(jīng)驗(yàn)證 — NE-PER 試劑盒已在超過950種出版物中引用
•通用 – 來自培養(yǎng)細(xì)胞或組織的細(xì)胞核蛋白（僅適用于新鮮樣品）
•可擴(kuò)展 — 具有兩種試劑盒規(guī)格，用于從細(xì)胞和組織中生成提取物
•便利 — 指示簡(jiǎn)單，無需梯度超速離心
•可兼容 — 可用于下游測(cè)定，包括 Western 免疫印跡、凝膠遷移率測(cè)定、蛋白測(cè)定、報(bào)告基因測(cè)定和酶活性測(cè)定

NE-PER 試劑盒是一種核蛋白提取方法，涉及簡(jiǎn)單、逐步裂解細(xì)胞并離心分離細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)蛋白組分。只需要使用臺(tái)式微量離心機(jī)、試管和移液器工具。NE-PER 試劑可將各種細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白高效溶解并分離為小份，使基因組 DNA 和 mRNA 的交叉污染或干擾極少。脫鹽或稀釋后，分離的蛋白可用于進(jìn)行免疫檢測(cè)以及蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)，如遷移率變動(dòng)分析 (EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和沉淀分析。

有多種方法可用于分離細(xì)胞核并制備細(xì)胞核蛋白提取物。大多數(shù)制備細(xì)胞核提取物的方法都是繁瑣的流程，需要可能影響細(xì)胞核蛋白完整性的機(jī)械均質(zhì)化、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟。NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒是一種基于試劑的方案，可逐步裂解細(xì)胞、從完整的細(xì)胞核中分離細(xì)胞質(zhì)，然后從基因組 DNA 和 mRNA 中提取出細(xì)胞核蛋白。在使用培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，這一溫和的流程只需不到兩小時(shí)并且只需要一臺(tái)標(biāo)準(zhǔn)的臺(tái)式離心機(jī)。此外，可以從同一細(xì)胞培養(yǎng)或組織樣品中回收活性細(xì)胞核蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白。

該試劑盒通常可從200萬個(gè)細(xì)胞中產(chǎn)生 200-500 µg 細(xì)胞質(zhì)蛋白和 100-200 µg 細(xì)胞核蛋白（濃度為 1 mg/mL）。細(xì)胞溶質(zhì)和細(xì)胞核部分間的典型交叉污染率為大約 10%。該方法主要從細(xì)胞核中回收可溶性蛋白，而不是在染色質(zhì)中結(jié)合的蛋白或細(xì)胞核包膜的整合膜蛋白。細(xì)胞核提取物的蛋白濃度可通過在提取中采用不同體積的細(xì)胞核提取試劑 (NER) 很容易的進(jìn)行控制，提取效率不會(huì)有任何重大損失。從細(xì)胞中特定提取各種細(xì)胞核蛋白對(duì)于很多基因調(diào)控研究的成功非常重要。盡管有多種方法可用于分離細(xì)胞核并制備細(xì)胞核蛋白提取物，但這些方法的大多數(shù)都很繁瑣，需要采用可能影響很多脆弱細(xì)胞核蛋白完整性的機(jī)械均質(zhì)化、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟。NE-PER 試劑盒克服了這些問題，可為 EMSA 和其他分析技術(shù)提供高質(zhì)量、濃縮的細(xì)胞核蛋白提取物。

Thermo NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑